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Caracterización de la Muerte Celular Generada por la Terapia Fotodinámica en una Línea Celular de Cáncer de Mama
NAYELI FERNANDA PEREZ PEREZ
TERESITA SPEZZIA MAZZOCCO
MARIA GUADALUPE DELGADO LOPEZ
Acceso Abierto
Atribución-NoComercial-SinDerivadas
Cáncer de mama
Terapia Fotodinámica
Azul de metileno
Rosa de bengala
Muerte celular
Introduction: Breast cancer is the leading cause of mortality among women worldwide. The therapies applied to this disease (chemotherapy, radiotherapy, hormonal therapy) in general are invasive and nonspecific techniques. Photodynamic therapy (PDT) is an anticancer therapy that can destroy tumor cells, through the interaction of a photosensitizing agent, which when stimulated by the appropriate wavelength induces the formation of reactive oxygen species that cause cell death. PDT is a minimally invasive, non-ionizing procedure and a promising new alternative to fight cancer, however, the molecular mechanisms that lead cells to death remain unclear. Methods: In this study, we characterized the type of death caused by PDT in a human triple negative breast cancer cell line (MDA-MB-231) with highly aggressive, invasive and poorly differentiated epithelial morphology, and an epithelial cell line Non-tumorigenic human mammary gland (MCF 10A), were used as photosensitizers to methylene blue and rose flare. The cells were incubated in the absence or presence of the photosensitizer and irradiated or not at 10 J / cm2. Observations were made by optical microscopy with Giemsa staining and fluorescence microscopy with Hoechst staining to assess morphological changes and determine the type of cell death caused. In addition, the measurement of the presence of reactive oxygen species in the cells was carried out by means of flow cytometry. Finally, a viability test (MTT) was performed for the non-tumorigenic line (MCF 10A), for PDT treatments with both photosensitizers. For the MDA-MB-231 cell line, the viability values reported in previous work were considered. Results: we observed that the PDT with bengal rose or methylene blue, caused the death of the cancer cells, however, the non-tumor cells did not respond to the treatment. Which suggests a selectivity of the treatment by the tumor cells. The results of the MTT viability test on the MCF 10A line confirmed that non-tumorigenic cells have no decrease in the activity of the enzyme succinate dehydrogenase and therefore remain viable even after treatment.
Introducción: El cáncer de mama es la principal causa de mortalidad entre las mujeres de todo el mundo. Las terapias aplicadas a esta enfermedad (quimioterapia, radioterapia, terapia hormonal) en general son técnicas invasivas e inespecíficas. La terapia fotodinámica (TFD ó PDT por sus siglas en inglés), es una terapia anticancerígena que puede destruir células tumorales, mediante la interacción de un agente fotosensibilizante, que cuando es estimulado por la longitud de onda apropiada induce la formación de especies reactivas de oxígeno (EROS ó ROS, por sus siglas en inglés) que causan muerte celular. La TFD es un procedimiento mínimamente invasivo, no ionizante y una nueva y prometedora alternativa para combatir el cáncer, sin embargo, los mecanismos moleculares que conducen a las células a la muerte siguen sin estar claros. Métodos: en este estudio, caracterizamos el tipo de muerte provocado por la TFD en una línea celular de cáncer de mama triple negativo humano (MDA-MB-231) con morfología epitelial, altamente agresivo, invasivo y poco diferenciado, y una línea celular epitelial humana no tumorigénica de glándula mamaria (MCF 10A), se utilizaron como fotosensibilizadores al azul de metileno y al rosa de bengala. Las células se incubaron en ausencia o presencia del fotosensibilizador y se irradiaron o no a 10 J/cm2. Se hicieron observaciones por microscopía óptica con tinción de Giemsa y microscopía de fluorescencia con tinción de Hoechst para evaluar los cambios morfológicos y determinar el tipo de muerte celular provocado. Además, se llevó a cabo la medición de la presencia de especies reactivas de oxígeno en las células por medio de citometría de flujo. Finalmente se realizó un examen de viabilidad (MTT) para la línea no tumorigénica (MCF 10A), para los tratamientos de TFD con ambos fotosensibilizadores. Para la línea celular MDA-MB-231, se consideraron los valores de viabilidad reportados en un trabajo previo. Resultados: observamos que la TFD con rosa de bengala o azul de metileno, produjo la muerte de las células cancerosas, sin embargo, las células no tumorales no respondieron al tratamiento. Lo que sugiere una selectividad del tratamiento por las células tumorales. Los resultados de la prueba de viabilidad por MTT en la línea MCF 10A confirmaron que las células no tumorigénicas
Instituto Nacional de Astrofísica, Óptica y Electrónica.
2021-09
Tesis de maestría
Español
Estudiantes
Investigadores
Público en general
Pérez Pérez, Nayeli Femanda, (2021), Caracterización de la Muerte Celular Generada por la Terapia Fotodinámica en una Línea Celular de Cáncer de Mama, Tesis de Maestría, Instituto Nacional de Astrofísica, Óptica y Electrónica.
ENFERMEDADES INFECCIOSAS
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